尽管PH（10.00）的电泳缓冲液并不与细胞或组织中的生理PH相符，但是在生理PH（8.00）的缓冲体系下蛋白会连续洗脱并分成不同的部分。分离系统包括电泳槽和分部收集器，这些装置要置于冰箱中。

1.3.2凝胶特征

为了得到一个PAGE所需的聚合完全的凝胶，聚丙烯酰胺凝胶需要在室温下凝聚69hr。最后，得到均质的含机械稳定和自由的单体或原子。凝胶的孔径很大，因此分子筛作用在电泳分离中最小化。基于上述原因，凝胶和活性分子之间的相互作用可以忽略。待分离的金属蛋白（如金属分子伴侣，蛋白酶感染性初级因子，金属运输蛋白，淀粉状蛋白，金属酶，金属肽等）不会分解成脱辅蛋白和金属辅助因子。孤立蛋白的生物活性结构（天然或3D构象）在QPNC-PAGE后不会发生构象变化。所以，金属蛋白和蛋白异构体在PAGE中被定量的分成高纯度的部分。QPNC与其它电泳技术如SDS-PAGE，2-DE，等速电泳和CN- PAGE等相比被称为“突破性的方法”。

1.3.3 实验方法

（1）储备液

1）200mM Tris-HCl 10mM NaN3 PH10.00，室温

2）200mM Tris-HCl 10mM NaN3 PH8.00，室温

3）40%丙烯酰胺/双丙烯酰胺2.67C，4℃（新鲜）

（2）电泳缓冲液

20mM Tris-HCl 1mMNaN3 PH10.00（除气），4℃

电泳槽上部：500ml电泳缓冲液

电泳槽下部：2000ml电泳缓冲液

（3）洗脱液

20mM Tris-HCl 1mMNaN3 PH8.00（除气），4℃

洗脱室：700ml洗脱缓冲液

（4）分离胶

丙烯酰胺4%T 体积40ml

成分：4ml40%丙烯酰胺/双丙烯酰胺2.67C4ml 200mM Tris-HCl 10mM NaN3 PH10.0032 mL H2O200 μL 10% APS20 μL TEMED